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设计实验体验酶作用的专一性

发布时间:2012-09-20

设计实验体验酶作用的专一性

    酶作用的专一性是酶与一般化学催化剂的主要区别之一,所谓酶作用的专一性,即酶只能催化一种或一类化学反应,而对其它物质则不能发挥催化作用。正是因为酶作用的专一性,才使得生物体内复杂多样的细胞代谢能够有条不紊的进行。本实验以蔗糖酶(来源于酵母)及淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用为例,来探究酶作用的专一性。

    淀粉和蔗糖无还原性,但在淀粉酶的作用下,淀粉很容易水解成为麦芽糖、葡萄糖(均具有还原性)。在同样的条件下,淀粉酶不能催化蔗糖的水解,蔗糖酶能催化水解蔗糖生成具有还原性的葡萄糖和果糖,但不能催化淀粉水解.

本实验采用本尼迪克特(Benedict)试剂检测还原糖。它与还原性糖反应的结果是与斐林试剂一致的,只是比斐林试剂更稳定。

目的要求:

尝试设计实验验证酶作用的专一性,并体验设计实验的一般原则(单因子变量原则和对照试验原则)。

材料用具:

1. 试剂:2% 蔗糖溶液,1%可溶性淀粉淀液(称取可溶性淀粉1,加水10 mL搅成糊状,倾入90 mL预先煮沸的蒸馏水中,搅拌均匀,再煮沸23分钟,冷却后定容至100 mL此溶液需新鲜配制),枯草杆菌α―淀粉酶的稀释液,蔗糖酶液(取适量干酵母100 ,置于研钵内,加少量细砂及50 mL蒸馏水,用力研磨提取约l小时,再加蒸馏水使总体积为500 mL左右,过滤。滤液保存于冰箱内备用。)本尼迪克特(Benedict)试剂,简称本氏试剂(将17.3硫酸铜溶于约50mL蒸馏水中,另将173 柠檬酸钠及100碳酸钠加于约800mL蒸馏水中,加热,搅拌使之溶解,冷却后将上述碳酸铜溶液缓缓倾入柠檬酸一碳酸钠溶液中,混匀,并稀释到100mL。此试剂可长期保存。)

2. 用具:大小、材质相同的试管若干,试管架,滴管,小量筒,恒温水浴锅,大、小烧杯,酒精灯,三脚架,石棉网,火柴、蒸馏水

方法步骤:

    1. 2支试管,分别编号12,然后各加入本氏试剂2 mL,分别加入l %可溶性淀粉溶液和2 %蔗糖溶液各4滴,混合均匀后,放在沸水浴中煮23分钟,观察有无砖红色沉淀发生。

2. α―淀粉酶的专一性试验:

1)取3 支相同的试管,分别编号123,分别加入等量的(3 mL1 %可溶性淀粉、2 %蔗糖溶液及蒸馏水。

2)再向3支试管各添加α―淀粉酶稀释液lmL,混合均匀。

3)放入37 恒温水浴中保温15分钟后取出。

4)向3支试管中各加本氏试剂2 mL,混合均匀,将试管放在沸水浴中煮23分钟。

5)观察每支试管中出现的颜色变化并记录。

3. 蔗糖酶的专一性试验:

1)取3 支相同的试管,分别编号123,分别加入等量的(3 mL1 %可溶性淀粉、2 %蔗糖溶液及蒸馏水

2)向3支试管各添加蔗糖酶液l mL,混合均匀。

3)放入37 恒温水浴中保温10分钟后取出。

4)向3支试管中各加本氏试剂2 mL,混合均匀,将试管放在沸水浴中煮23分钟。

5)观察每支试管中出现的颜色变化并记录。

讨论:

1. 步骤1中,两支试管中分别出现什么现象?这一现象说明了什么?

2. 步骤23中,3号试管加蒸馏水的目的是什么?三支支试管中分别出现什么现象?分析这些现象,说明了什么?

3. 上述实验步骤中如何控制变量,排除其他因素对实验结果的干扰?

结论:

通过对实验结果的分析和讨论,你对酶的作用形成了哪些认识?请将结论写下来。

本实验的结论:                                                   

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

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