贮藏条件和时间对蔬菜中亚硝酸盐含量的影响
1．实验原理
实验样品经沉淀蛋白质除去脂肪后，在弱酸条件下硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，生成的重氮化合物，再与萘基盐酸二氨乙烯偶联成紫红色的重氮染料，产生的颜色深浅与亚硝酸根含量成正比，其最大吸收波长为538nm ，测定吸光度并与标准比较定量。
2.材料用具
黄瓜1180g、茄瓜、小白菜770g、菠菜380g、土豆900g、白萝卜1530g。
亚铁氰化钾、乙酸锌、冰乙酸、四硼酸钠、对氨基苯磺酸、36.46%的盐酸、盐酸萘乙二胺、亚硝酸钠、活性炭。
分光光度计、小型搅碎机、干燥箱、电磁炉和锅、电子天平、恒温水浴锅、冰箱、250mL容量瓶18个、150mL锥形瓶3个、大试剂瓶1个、托盘2个、250mL量筒2个、移液管（25mL 2支，5mL4支，10mL1支，2mL8支，1mL3支）、烧杯（250mL2个，150mL3个,50mL10个）。
3.方法步骤
3.1试剂配制
①亚铁氰化钾溶液：称取106g亚铁氰化钾，溶于水，并稀释至1000mL。
②乙酸锌溶液：称取220g乙酸锌，加30mL冰乙酸溶于水，并稀释至1000mL。
③饱和硼砂溶液：称取5g硼酸钠，溶于100mL热水中，冷却后备用。
④0.4%对氨基苯磺酸溶液：称取0.4g对氨基苯磺酸，溶于100mL20的盐酸中，置棕色试剂瓶中混匀，避光保存。
⑤0.2%盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2g盐酸萘乙二胺，溶于100mL水中，混匀后，置棕色试剂瓶中，避光保存。
⑥亚硝酸钠标准溶液：准确称取0.1000g于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠，加水溶解移入500mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。此溶液每毫升相当于200ug亚硝酸钠。
⑦亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液5.00mL，置于200mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。此溶液每毫升相当于5ug亚硝酸钠。
3.2材料处理
将购回的6种新鲜菜样分别均等分为3份：一份常温下贮藏；一份在冰箱中冷藏；最后一份在冰箱中用保鲜膜密封冷藏测定蔬菜中亚硝酸盐的含量时，本实验采用国家标准中推荐的 “盐酸萘乙二胺比色法”。
3.3样品处理
①称取10.0g经绞碎混匀的样品，置于50mL烧杯中。②在烧杯中加入25mL硼砂饱和溶液，搅拌均匀。
③以70℃的水150mL将样品全部洗入250mL容量瓶中。置沸水浴中加热15min，取出后冷至室温。
④加入5mL亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5mL乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。
⑤定容：加水至刻度，混匀，放置0.5h，除去上层脂肪。
⑥过滤：用滤纸过滤，在滤纸上均匀撒上活性炭约3g，弃去初滤液30mL，后取40mL滤液备用。
3.4绘制亚硝酸钠标准曲线
3.5亚硝酸盐含量的测定
吸取40mL上述滤液于50mL带塞比色管中，加入2mL 0.4%对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3~5min后各加入1mL盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置15min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度。样品中亚硝酸盐的含量X(mg/kg)=
3.6记录结果
4.分析结果，得出结论
通过表中数据绘制曲线。
本实验的结论：________________________________________________________。
5.讨论
①本实验的研究结果对你有什么启示？
②如果想进一步探究不同的冷藏时间下蔬菜中亚硝酸盐的含量，应如何设计实验？
编制：路洪娜